real time pcr

real time pcr

شرکت زیست دهش خاورمیانه وارد کننده ، نمایندگی فروش تخصصی و خدمات پس از فروش ریل-تایم پی سی آر (Real-Time PCR) و پی سی آر گرادینت (Gradient PCR) در ایران، آماده همکاری با تمامی مراکی درمانی، آموزشی، پژوهشی و تحقیقاتی… است.

واکنش زنجیره ای پلیمراز در زمان واقعی (Real-Time PCR) در یک سیکلر حرارتی با ظرفیت نورپردازی هر نمونه با یک پرتو نور حداقل یک طول موج مشخص و تشخیص فلورسانس ساطع شده توسط فلوروفور بر انگیخته انجام می شود. سیکلر حرارتی همچنین قادر است نمونه ها را به سرعت گرم و سرد کند ، در نتیجه از ویژگی های فیزیکوشیمیایی اسیدهای نوکلئیک و DNA پلیمراز بهره می برد. روند PCR به طور کلی شامل یک سری تغییرات دما است که ۲۵-۵۰ بار تکرار می شود. این چرخه ها به طور معمول از سه مرحله تشکیل شده اند: مرحله اول ، در حدود ۹۵ درجه سانتیگراد ، اجازه می دهد تا زنجیره دوتایی اسید نوکلئیک جدا شود. مرحله دوم ، در دمای حدود ۵۰-۶۰ درجه سانتیگراد ، اتصال آغازگرها با الگوی DNA را امکان پذیر می کند ؛ مرحله سومین ، در دمای ۶۸-۷۲ درجه سانتیگراد ، پلیمریزاسیون انجام شده توسط DNA پلیمراز را تسهیل می کند. به دلیل کوچک بودن قطعات ، مرحله آخر معمولاً در این نوع PCR حذف می شود ، زیرا آنزیم قادر است تعداد آنها را در طول تغییر بین مرحله تراز و مرحله دناتوراسیون افزایش دهد. بعلاوه ، در PCR چهار مرحله ای ، فلورسانس در طی مراحل کوتاه دمایی که فقط چند ثانیه در هر چرخه طول می کشد ، با دمای مثلا ۸۰ درجه سانتیگراد ، اندازه گیری می شود تا سیگنال ناشی از وجود دایمرهای آغازگر (Primer Dimer) کاهش یابد. هنگامی که از یک رنگ غیر خاص استفاده می شود. دما و زمان استفاده شده برای هر چرخه به طیف گسترده ای از پارامترها بستگی دارد ، مانند: آنزیم مورد استفاده برای سنتز DNA ، غلظت یونهای دو ظرفیتی و دی اکسی ریبونوکلئوتیدها (dNTP) در واکنش و دمای پیوند آغازگرها.